OmniPlex dPx предназначена для одновременного определения белковых маркеров и нуклеиновых кислот в отдельных внеклеточных везикулах. Такой подход позволяет исследовать неоднородность образца на уровне отдельных частиц, а не ограничиваться усреднённым результатом по всей пробе.
Что анализирует платформа
Внеклеточные везикулы — это окружённые мембраной частицы, которые клетки выделяют во внеклеточную среду. Они могут переносить белки, дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) и рибонуклеиновую кислоту (РНК), поэтому их состав рассматривают как источник информации о состоянии клеток, тканей и органов. Экзосомы представляют собой один из типов внеклеточных везикул.
Основная аналитическая проблема связана с гетерогенностью таких частиц. Даже в одном образце могут присутствовать разные субпопуляции везикул, включая редкие. Согласно исходным материалам, иммуноферментный анализ (ИФА), проточная цитометрия и анализ траекторий наночастиц (NTA) дают преимущественно усреднённое представление о пробе. В результате связь конкретного поверхностного фенотипа с содержимым отдельной частицы может оставаться неразличимой.
Как устроен принцип OmniPlex dPx
Изоляция отдельных частиц
Анализ проводится в изолированных микрокаплях. Такой формат создаёт отдельные реакционные объёмы и позволяет регистрировать сигналы, относящиеся к единичным везикулам.
ДНК-баркодирование белковых маркеров
ДНК-баркодированные антитела — это антитела, связанные с определяемыми последовательностями ДНК. Антитело распознаёт белковый маркер, а соответствующий ДНК-баркод служит амплифицируемой меткой.
Цифровая капельная ПЦР
Цифровая капельная полимеразная цепная реакция (dPCR) распределяет аналитические события по множеству микрореакций. Амплификация позволяет регистрировать ДНК-баркоды антител, а также целевые ДНК или РНК, связанные с анализируемой везикулой.
Совмещение белковых и генетических сигналов
Одновременная регистрация маркеров в одной микрокапле связывает поверхностный белковый профиль частицы с присутствующими в ней нуклеиновыми кислотами. В исходном материале этот подход обозначен как single-particle multi-omics — мультиомиксный анализ единичных частиц.
Что меняется по сравнению с усреднённым анализом
Ключевое отличие OmniPlex dPx состоит не только в параллельном определении нескольких типов мишеней, но и в сохранении информации об их совместной локализации в отдельной частице. Это позволяет выделять субпопуляции по сочетанию белковых и молекулярных признаков.
Цифровой формат предусматривает абсолютный подсчёт в частицах/мкл без калибровочных кривых. Расчёт основан на статистике Пуассона — математической модели, используемой для оценки исходного количества аналитических событий по распределению положительных и отрицательных микрореакций.
В материалах также заявлены фемтомолярная чувствительность, возможность различать «полные» и «пустые» частицы, работа с образцами объёмом от 1 мкл и высокая толерантность реакций к примесям. Однако численные пределы обнаружения, данные сравнительных исследований и критерии определения «полных» и «пустых» частиц в предоставленном источнике не приведены.
Области применения
- Онкология
- Кардиология
- Диабет и метаболические заболевания
- Нейродегенеративные заболевания
- Иммунология
- Акушерство
В онкологических исследованиях платформа рассматривается для детекции редких циркулирующих опухолевых везикул, определения их поверхностных маркеров и анализа упакованных онкогенных РНК. В кардиологии предполагается изучение кардиоспецифичных микровезикул при ишемии миокарда, сердечной недостаточности и атеросклерозе.
Для метаболических заболеваний указана оценка экзосомального профиля при инсулинорезистентности, стрессе бета-клеток и диабетических осложнениях. В неврологии предметом анализа могут быть нейрональные и глиальные везикулы в крови и ликворе — спинномозговой жидкости — при болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона и боковом амиотрофическом склерозе (БАС).
В иммунологии технология может применяться для исследования везикул иммунных клеток при аутоиммунных процессах, сепсисе и иммунодефицитах. В акушерстве в исходном материале отмечен мониторинг плацентарных экзосом в крови матери как потенциальных неинвазивных маркеров преэклампсии, задержки роста плода (ЗРП) и других патологий беременности.
Основные характеристики метода
| Характеристика | Описание |
|---|---|
| Аналитический принцип | |
| Объект анализа | Отдельные внеклеточные везикулы в изолированных микрокаплях |
| Белковые маркеры | Иммуноанализ с ДНК-баркодированными антителами |
| Нуклеиновые кислоты | Определение ДНК и РНК методом цифровой капельной ПЦР |
| Совместный анализ | Регистрация белковых маркеров и нуклеиновых кислот одной частицы |
| Заявленные аналитические возможности | |
| Количественный результат | Абсолютный цифровой подсчёт в частицах/мкл на основе статистики Пуассона, без калибровочных кривых |
| Чувствительность | Фемтомолярная; численные показатели в исходном материале отсутствуют |
| Объём образца | От 1 мкл |
| Анализ смесей | Заявлена возможность определения «полных» и «пустых» частиц |
| Примеси | Заявлена высокая толерантность реакций к примесям без потери чувствительности; подтверждающие показатели не представлены |
Практические выводы для лаборатории
OmniPlex dPx представляет интерес для задач, в которых принципиально важно установить сочетание нескольких признаков на одной везикуле. Наиболее заметное методологическое преимущество по сравнению с анализом всей популяции заключается в возможности выявлять редкие субпопуляции и сопоставлять их белковый фенотип с нуклеиновыми кислотами.
При оценке внедрения следует отдельно запросить сведения о пределах обнаружения и количественного определения, специфичности панелей, воспроизводимости, пропускной способности, требованиях к подготовке образцов и результатах сопоставления с референсными методами. Эти данные, а также сведения о клинической валидации и регуляторном статусе, в предоставленных материалах отсутствуют. Поэтому перечисленные медицинские направления следует рассматривать как области исследовательского применения и перспективы, а не как подтверждённые клинико-диагностические показания.
Запись вебинара Е-ЛАБ
Вебинар Е-ЛАБ «OmniPlex dPx: революционная система цифрового мультиомиксного анализа единичных микровезикул. Принцип метода и приложения» состоялся 24 сентября 2026 года. Ведущая — Ольга Александровна Шикшина, руководитель направления «Клеточная терапия» ООО «Е-ЛАБ».
Повторный просмотр доступен по ссылке: запись вебинара OmniPlex dPx.
